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更新時(shí)間:2026-08-07
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qubit檢測(cè)范圍
Qubit熒光定量?jī)x的檢測(cè)范圍并非固定不變,它取決于你選用的試劑盒類(lèi)型。不同的試劑盒就像不同量程的尺子,分別對(duì)應(yīng)高靈敏度(HS)和寬范圍(BR)等不同需求。
以下是實(shí)驗(yàn)室常用的幾種Qubit檢測(cè)試劑盒及其對(duì)應(yīng)的核心檢測(cè)范圍,供你快速參考。
一、常用Qubit試劑盒檢測(cè)范圍一覽
dsDNAHS(高靈敏度):適用于微量、珍貴的DNA樣本,如NGS文庫(kù)、細(xì)胞游離DNA等。初始樣本濃度在0.01-10ng/µL之間時(shí),結(jié)果較準(zhǔn)確。
dsDNABR(寬范圍):適用于大多數(shù)常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的DNA定量。初始樣本濃度在0.1-120ng/µL之間時(shí),結(jié)果較準(zhǔn)確。
RNAHS(高靈敏度):適用于RNA-Seq等對(duì)RNA濃度敏感的下游實(shí)驗(yàn)。初始樣本濃度在0.02-10ng/µL之間時(shí),結(jié)果較準(zhǔn)確。
RNABR(寬范圍):適用于一般的RNA定量。初始樣本濃度在0.5-60ng/µL之間時(shí),結(jié)果較準(zhǔn)確。
ssDNA(單鏈DNA):適用于引物、探針等寡核苷酸的定量。初始樣本濃度在0.01-8ng/µL之間時(shí),結(jié)果較準(zhǔn)確。
Protein(蛋白質(zhì)):適用于蛋白質(zhì)濃度測(cè)定。初始樣本濃度在0.5-20µg/µL之間時(shí),結(jié)果較準(zhǔn)確。
二、Qubit與Nanodrop檢測(cè)范圍的差異
在實(shí)際應(yīng)用中,Qubit與Nanodrop的檢測(cè)范圍是互補(bǔ)的,它們適用于不同的場(chǎng)景。
Qubit的靈敏度很高,尤其適合檢測(cè)低濃度的樣本(如pg/µL級(jí)別)。但它對(duì)高濃度樣本(如µg/µL級(jí)別)的耐受性不如Nanodrop,高濃度時(shí)容易飽和。
Nanodrop的優(yōu)點(diǎn)是范圍廣,從2ng/µL到15,000ng/µL都能覆蓋,無(wú)需稀釋即可直接測(cè)量高濃度樣品。但它的靈敏度有限,在低濃度范圍(<2ng/µL)準(zhǔn)確性會(huì)下降。
因此,在實(shí)驗(yàn)中可以根據(jù)樣本情況靈活選擇:當(dāng)樣本珍貴且濃度很低,或者需要區(qū)分DNA、RNA時(shí),用Qubit會(huì)更準(zhǔn)確;當(dāng)樣本量充足、濃度較高,需要快速獲得純度比值(如A260/A280)作為參考時(shí),用Nanodrop會(huì)更方便。
三、選擇試劑盒時(shí)的一些思路
Qubit檢測(cè)的精髓在于“對(duì)癥下藥",根據(jù)你的樣本情況選擇合適的試劑盒,就能獲得比較理想的結(jié)果:
看樣本濃度:如果樣本濃度很低或非常珍貴(如臨床樣本、NGS文庫(kù)),優(yōu)先選擇“HS"系列。
看樣本純度:如果樣本含有較多雜質(zhì)(如蛋白、鹽離子),Qubit的選擇性?xún)?yōu)勢(shì)會(huì)更明顯,而Nanodrop可能會(huì)被嚴(yán)重干擾。
看實(shí)驗(yàn)?zāi)康模喝绻罄m(xù)實(shí)驗(yàn)對(duì)核酸的起始量要求很高(如qPCR、NGS建庫(kù)),Qubit的準(zhǔn)確定量就很有必要。
總結(jié)
總之,Qubit的檢測(cè)范圍因試劑盒而異,覆蓋了從pg/µL到µg/µL級(jí)別的多個(gè)區(qū)間。在實(shí)際使用中,可以根據(jù)樣本的濃度和純度靈活選擇合適的試劑盒,以確保定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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